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层析技术

层析柱在层析技术中属于主体,正常用玻璃管or有机玻璃管。一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,层析柱的直径大小不影响别离度,样品用量大,可加大柱的直径,但在加样时应将样品平均散布于凝胶柱上。除此, 直径变大,洗脱液体变大,稀释度变大。别离度取决于柱的高度,为别离不同组分,凝胶柱床必然需要有合适的高度,分离度和柱高平方根有关系,可是因为软凝胶柱过高挤压变形,一般不超越1米。别离时用短柱,一般凝胶柱长20-30厘米,柱高与直径的比力5:1─10:1,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。 分级别离时柱高与直径之线为20:1─100:1,常用凝胶柱有50×25厘米,10×25厘米。层析柱滤板的死体积应尽能够的小,假如支掌滤板下的死体积大,那么被别离组分之间重新混合的能够性就大,其后果是影响洗脱峰形,呈现拖尾出象,降低分辩力。在准确别离时,死体积不能超越总床体积的1/1000。


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